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其林貝爾

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蛋白酶解特性分析(其林貝爾振蕩器使用)

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2020-04-14 10:17【

1 材料與方法 


1.1 主要原料與試劑 


羅非魚魚鱗(蛋白質(zhì)含量 55.87%),湛江環(huán)球 水產(chǎn)有限公司;堿性蛋白酶 Alcalase 3L(酶活力為 3.0 AU/g), 諾維信公司; 馬尿酸 (Hippuric acid, HA)、 馬尿酰-組氨酰-亮氨酸 (N-hippuryl-HisLeu tetrahydrate,HHL)、 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(Angiotensin Converting Enzyme from rabbit lung,ACE)、鄰苯二甲醛(OPA)、抑肽酶、細(xì)胞色素 C、碳 酸酐酶、桿菌肽等均購于 Sigma 公司。 甲醇、乙腈 (色譜純)。 


1.2 主要設(shè)備與儀器 


400Y 多功能粉碎機(jī),永康市鉑歐五金制品有 限公司;DGG-9123A 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱, 上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;DSHZ-300A 旋轉(zhuǎn)式恒溫 振蕩器, 太倉市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠;Fresco 21 冷凍高速 離心機(jī),美國 Thermo Fisher 公司;QL-8bb-253 旋 渦振蕩器, 海門市其林貝爾儀器制造有限公司; MLS-3781L 高壓滅菌鍋,日本 Panasonic 公司;紫 外分光光度計(jì), 美國 ThermoFisher 公司;e2695 高 效液相色譜, 美國 Waters 公司;K-360 凱氏定氮 儀,K-425 快速消解儀,瑞士 BUCHI 公司。


2 結(jié)果分析


未經(jīng)熱處理時(shí),魚鱗蛋白蛋白 質(zhì)回收率和水解度分別為 4.12%和 0.2%, 魚鱗蛋白經(jīng)不同高溫處理 30 min 后,蛋白回收率和水解 度均有顯著提高(P<0.05)。 當(dāng)熱處理溫度由 25 ℃ 升高到 121 ℃時(shí), 蛋白質(zhì)回收率和水解度增大到 63.56%。進(jìn)一步升高溫度,蛋白質(zhì)回收率變化不明 顯,但水解度進(jìn)一步增大。魚鱗蛋白酶解產(chǎn)物蛋白回收 率和水解度在 25~121 ℃時(shí)隨溫度升高而快速上 升 , 進(jìn)一步提高溫度 , 二 者 變 化 均 不 顯 著 (P > 0. 05)。


3 結(jié)語


對羅非魚魚鱗進(jìn)行了不同條件的熱處 理,并以蛋白回收率和水解度為考察指標(biāo),綜合生 產(chǎn)成本和實(shí)際應(yīng)用方面考慮, 確定最佳的熱處理 條件為處理溫度 121 ℃、處理時(shí)間 15 min,底物質(zhì) 量分?jǐn)?shù) 2%,在此條件下魚鱗蛋白酶解產(chǎn)物蛋白回 收率達(dá) 65.93%,水解度為 10.54%,比未熱處理組 分別提高了 78.29%和 89.23%,不同程度的熱處理 對酶解產(chǎn)物的降血壓活性均有一定程度的增強(qiáng)作 用, 其 中 121 ℃、15 min 處理增強(qiáng)效果最佳,其 ACE 抑 制 率 為 73.80%, 比未熱處理組提高了 66.78%。






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