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其林貝爾搖床的細(xì)胞增殖的因素分析

返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2020-08-31 09:01【

1 材料


BP211D 型 1/1 萬(wàn)天平(德國(guó) Sartorius 公 司);BDS400 型倒置顯微鏡(中國(guó) Opetec 公司);SC3610 型低速離心機(jī)(安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公 司);HF212 型二氧化碳培養(yǎng)箱(上海力申科學(xué)儀器 有限公司);YT-CJ-1N 型超凈工作臺(tái)(北京亞泰科隆 儀器技術(shù)有限公司);Multiskan FC 型酶標(biāo)儀[賽默 飛世爾(上海)儀器有限公司];TS-1 型水平脫色搖 床( 海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司 );LDZF75L-11 型立式高壓蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械 廠);KQ-100E 型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有 限公司);FACS CantoⅡ流式細(xì)胞儀(美國(guó) BectonDickinson 公司);ChemiDocTM型 MP Imaging System (美國(guó) Bio-Rad 公司)。


2 方法


As2O3溶液配置:將購(gòu)買(mǎi)的 化 合 物 溶 解 于 1 mol·L-1 的 氫 氧 化 鈉 中 ,加 入 1 mol·L-1的鹽酸調(diào) pH 至 7.0,再加入生理鹽水將其 稀釋成濃度為 10 mmol·L-1的亞砷酸鹽溶液,濾過(guò)除 菌,4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。臨用前取少量亞砷酸鹽溶 液,用 RPMI 1640 培養(yǎng)基稀釋成所需濃度。DHA 溶 液配置,將購(gòu)買(mǎi)的化合物溶解于 DMSO,配制成濃 度為 100 mmol·L-1 的 DHA 濃溶液,濾過(guò)除菌,4 ℃ 冰 箱 保 存 備 用 。 臨 用 前 取 適 量 DHA 濃 溶 液 ,用 RPMI 1640 培養(yǎng)基稀釋成所需濃度。將 THP-1 細(xì)胞培養(yǎng)于含 10% 胎牛 血清,1% 青-鏈霉素混合液(100 U·mL-1 青霉素和 100 mg·L-1鏈霉素)和 0.05 mmol·L-1的 β-巰基乙醇 的 RPMI 1640 培養(yǎng)基中,培養(yǎng)于 37 ℃,5% CO2飽和 濕度的培養(yǎng)箱中。根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況,每 2~3 d 半 換液法傳代 1 次。






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