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細(xì)梗香草皂苷活性炭脫色工藝單因素試驗(yàn)

返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2021-12-17 10:30【

準(zhǔn)確移取稀釋 20 倍后的細(xì)梗香草皂苷提取 10mL 于具塞試管中,加入 3% 活性炭,搖勻 后放入 60℃水浴鍋中脫色 60min,固定其他條 件,分別對(duì)活性炭添加量、脫色時(shí)間、稀釋梯度 及脫色溫度 4 個(gè)因素進(jìn)行單因素脫色試驗(yàn),考察 各因素對(duì)細(xì)梗香草皂苷的保留率和脫色率的影 響。單因素設(shè)計(jì)水平見(jiàn)表 1。

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正交試驗(yàn)優(yōu)化脫色條件

為考察各因素的交互影響,根據(jù)單因素試驗(yàn) 結(jié)果,采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),以活性炭添加量、脫 色時(shí)間、稀釋梯度及脫色溫度為 4 個(gè)因素,細(xì)梗 香草皂苷提取液的保留率和脫色率為考察指標(biāo), 按照表 2 設(shè)計(jì) L9 34 )正交試驗(yàn),從而優(yōu)化脫色 工藝條件。

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細(xì)梗香草皂苷抑菌活性試驗(yàn)

將活化后培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期的大腸桿菌、金黃色 葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和白色念球菌的菌懸液 濃度調(diào)至 106 CFU/mL,取 100μL 菌液于 LB 培養(yǎng) 基平板上均勻涂布,打孔器分別打孔,孔中加入 不同濃度梯度的細(xì)梗香草皂苷提取液 100μL,平 板置于 4℃條件下預(yù)擴(kuò)散 2h 后,白色念球菌于 30℃恒溫培養(yǎng),其余放入 37℃恒溫培養(yǎng) 24h 后, 游標(biāo)卡尺測(cè)定抑菌圈的直徑。同時(shí)以甲醇溶液作 為空白對(duì)照。


活性炭添加量對(duì)脫色效果的影響

如圖 1 所示,總體上隨著活性炭添加量的增加,皂苷脫色率逐漸升高,保留率漸漸減小。當(dāng) 添加量達(dá) 3% 后,皂苷脫色率的增幅趨勢(shì)變??; 保留率隨活性炭用量增加而逐漸減小。根據(jù)試驗(yàn) 結(jié)果,為保證皂苷脫色率和保留率達(dá)一定水平, 選取活性炭用量 2% 為最佳添加量。

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脫色時(shí)間對(duì)皂苷脫色效果的影響 由圖 2 可以看出,伴隨著脫色時(shí)間的延長(zhǎng), 皂苷的脫色率有所上升,在 60min 之后趨于平 穩(wěn),而保留率相對(duì)處于比較平穩(wěn)的水平。這說(shuō) 明,當(dāng)試驗(yàn)進(jìn)行到一定程度后,脫色時(shí)間對(duì)脫色 效果的影響較不明顯,這可能由于活性炭對(duì)色素 的吸附作用在一定時(shí)間內(nèi)達(dá)到了平衡。所以考慮 選擇 60min 為脫色時(shí)間最優(yōu)條件

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